肿瘤综合治疗电子杂志

目的 探究微RNA-133b（microRNA-133b，miR-133b）通过靶向转胶蛋白-2（transgelin-2，TAGLN2）调控非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）增殖及侵袭转移能力的机制。方法 收集2021年1月至2022年12月于新疆医科大学附属肿瘤医院经手术切除的86例NSCLC患者的肿瘤样本与对应癌旁组织。对筛选的A549和NCI-H460细胞进行多组慢病毒转染实验，以研究不同基因表达[阴性对照组（转染miRNA阴性对照模拟物）、miR-133b模拟物组（转染miR-133b模拟物）、Scrambled组（转染miRNA阴性对照模拟物＋ pcDNA3.1空质粒）、沉默TAGLN2组（转染TAGLN2短发夹RNA）、TAGLN2组（转染TAGLN2）、miR-133b模拟物＋ TAGLN2组（转染miR-133b模拟物＋ TAGLN2）]对细胞的影响。采用实时定量反转录聚合酶链反应检测组织、细胞系miR-133b、TAGLN2表达水平，采用免疫组织化学检测组织TAGLN2表达水平，分析miR-133b表达水平与临床病理特征的关系。利用Starbase数据库进行预测，分析miR-133b与TAGLN2之间潜在的结合位点，验证miR-133b与TAGLN2的靶向作用关系。通过细胞计数（cell counting kit-8，CCK-8）试剂盒、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验观察miR-133b、TAGLN2对A549、NCI-H460细胞增殖、迁移、侵袭的影响。蛋白质印记法检测TAGLN2和上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transformation，EMT）相关信号通路蛋白表达。结果 miR-133b在NSCLC中呈低表达（P ＜ 0.05），TAGLN2呈高表达（P ＜ 0.05）。miR-133b表达与TAGLN2水平负相关（r ＝ -0.219 5，P ＝ 0.042 3），靶向调控TAGLN2表达。与阴性对照组相比，miR-133b模拟物组A549和NCI-H460细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力均显著降低（均P ＜ 0.05）。与Scramble组相比，沉默TAGLN2组A549和NCI-H460细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力、TAGLN2、磷酸化胰岛素样生长因子1受体（phospho-insulin-like growth factor 1 receptor，p-IGF1R）、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（phospho phosphoinositide 3-kinase，p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（phospho-protein kinase B，p-AKT）、锌指转录因子Snail 1表达水平均显著下降（均P ＜ 0.05），E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达水平均显著升高（均P ＜ 0.05）；TAGLN2组A549和NCI-H460细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力、TAGLN2、p-IGF1R、p-PI3K、p-AKT、Snail 1表达水平均显著升高（均P ＜ 0.05），E-cadherin表达水平均显著降低（均P ＜ 0.05）；与TAGLN2组相比，miR-133b模拟物＋ TAGLN2组A549和NCI-H460细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力、TAGLN2、p-IGF1R、p-PI3K、p-AKT、Snail 1表达水平均显著降低（均P ＜ 0.05），E-cadherin表达水平均显著升高（P ＜ 0.05）。结论 miR-133b通过靶向TAGLN2调控IGF1R/PI3K/AKT信号通路相关分子表达影响EMT过程，进而影响NSCLC增殖、侵袭及转移能力。